Sensitivitätsvergleich Chlamydia trachomatis spezifischer LCR und PCR für die Analyse von Synovialisbiopsien

Journal/Book: Z Rheumatol 1999; 58 Suppl. 1: I/26 (FE 17). 1999;

Abstract: 1Abt. Rheumatologie Medizinische Hochschule Hannover; 2Dept. Microbiol & Immunol Wayne State University Detroit Hintergrund: Die Diagnostik Chlamydia trachomatis (CT) induzierter Arthriden hängt entscheidend von einem hochsensitiven Nachweis des intraartikulär persistierenden Erregers ab. Kürzlich erhobene Befunde legen nahe daß die Erregerdiagnostik aus Synovialis höhere Sensitivitäten als aus Synovia erlaubt. Daten unserer Arbeitsgruppe haben gezeigt daß der hochsensitive intraartikuläre Nachweis von CT mittels PCR entscheidend von einer optimierten Aufarbeitung der Synovia abhängt. Ziel dieser Untersuchung war unterschiedliche Aufreinigungsverfahren für die Untersuchung von Synovialisbiopsien für die nachfolgende Untersuchung mittels Ligase-Kettenreaktion (LCR) und PCR zu untersuchen. Methoden: Von einer operativ entfernten Synovialmembran einer Patientin mit chronischer Polyarthritis wurden mittels Parker-Pearson Nadel zahlreiche sterile Biopsien entnommen. Diese Biopsien wurde anschließend mit einer definierten seriell absteigenden Menge von CT versetzt und auf drei verschiedenen Arten aufgereinigt: [1] Proteinase K-Verdau anschließend DNA-Aufreinigung mittels QiagenTissue Kit [2] 15 Minuten bei 97°C [3] Proteinase K-Verdau und anschließend 15 Minuten bei 97° C. Anschließend Untersuchung der Proben mittels LCR. Für Methode [1 ] erfolgte zusätzlich die Analyse mittels CT-spezifischer PCR. Ergebnisse: Die Sensitivität betrug nach Methode [1] 100 bis 102 Erreger für die LCR und 10-2 für die PCR nach Methode [2] 102 für die LCR. Methode [3] erlaubte keine zuverlässige Untersuchung mittels LCR. Aufgrund des verwendeten Puffers erlauben Methode [2] und [3] keine Untersuchung mittels PCR. Schlußfolgerung und Ausblick: Die Sensitivität der Untersuchung von Synovialmembran mittels LCR und PCR hängt von der vorausgehenden Probenaufreinigung ab. ... le

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