Enzymimmunoassays zum Nachweis von Autoantikörpern gegen nRNP und Sm: eine schnelle und sensitive Alternative zu den bisherigen Nachweisverfahren

Journal/Book: Z Rheumatol 51 2 (1992) 87-93. 1992;

Abstract: Dr. med. M. Blazek 1 Zentrallabor der Medizinischen Klinik und Poliklinik Heidelberg 2 Progen Biotechnik GmbH Heidelberg 3 Städtisches Klinikum Minden vormals Universitätsklinik Düsseldorf MNR-Klinik Zusammenfassung: Antikörper gegen Zellkernantigene spielen eine große Rolle bei der Differentialdiagnose entzündlich rheumatischer Erkrankungen. So zeigen Antikörper gegen die extrahierbaren nukleären Antigene Sm bzw. nRNP eine enge Korrelation mit Erkrankungen wie dem systemischen Lupus erythematodes bzw. der Mischkollagenose (MCTD). Die gängigen labordiagnostischen Methoden beinhalteten die Ouchterlony Doppelimmundiffusionstechnik die Hämagglutination und die Gegenstromimmunelektrophorese. Die Verwendung neuer Verfahren wie der ELISA-Technik bedeutet eine Verbesserung in der Diagnostik da mit diesem Verfahren sensitiv und quantitativ Antikörperspezifitäten erfaßt werden können. In dieser Arbeit wurden der Ouchterlony bzw. die Gegenstromimmunelektrophorese mit der ELISA-Technik verglichen. Als Antigen für Sm- bzw. nRNR-ELISA wurden aufgereinigte Zellkernproteine aus HeLa-Zellen eingesetzt. Während für das Sm-Antigen reines D-Protein verwendet wurde sind im nRNP-Antigen die 68 kD A C B B' und D Proteine enthalten. Die retrospektive Evaluierung der ELISA erfolgte mit einem größeren Panel bereits charakterisierter Seren. In unserer Studie erwiesen sich die ELISA in punkto Zeitersparnis Sensitivität und Quantifizierbarkeit den herkömmlichen Techniken als deutlich überlegen. Summary: Antinuclear antibodies are of major importance in the diagnosis of inflammatory rheumatic diseases. Sm and nRNP antibodies can be found in sera from patients with systemic lupus erythematosus and mixed connective tissue disease. Usually these antibodies have been detected with one of the following methods: Ouchterlony immunodiffusion passive hemagglutination or counterimmunoelectrophoresis (CIE). In this work results obtained by Ouchterlony and CIE techniques were compared with those obtained by ELISA. Purified proteins from cellular extracts (HeLa) were used as antigens for Sm- and nRNP-ELISA: D polypeptide for Sm-ELISA and the 68 kD A C B B' and D polypeptides for nRNP-ELISA. Compared with the other two techniques ELISA was less time consuming and showed greater sensitivity. Quantitative titration proved to be of advantage in monitoring the course of the diseases mentioned above. Key words: Sm; nRNP; lupus erythematosus; mixed connective tissue disease; ELISA wt

Keyword(s): Sm; nRNP; Lupus erythematodes; mixed connective tissue disease; ELISA

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