Beitrag zur Methode der papierchromatographischen 17-Ketosteroid-Bestimmung in Harn

Journal/Book: Sonderdruck 'Hoppe-Seyler's Zeitschrift für physiologische Chemie. Bd.309 5.221-225 1957 Walter de Gruyter & Co. Berlin. 1957;

Abstract: Aus dem Hauptlaboratorium der Schering A.G. Berlin (West) (Leiter: Prof. Dr. K. Junkmann) Der Schriftleitung zugegangen am 8. Juli 1957 Herrn Prof. Dr. K. Junkmann zum 60. Geburtstag gewidmet Zusammenfassung Es wird eine Methode zur quantitativen Bestimmung von 17-Ketosteroiden auf Papierchromatogrammen angegeben. Durch Wahl des Lösungsmittelsystems Dimethylformamid-Cyclohexan bei dreimaligem Lauf der mobilen Phase wird eine gute Auftrennung in schmalen Zonen erreicht. Die Zonen werden mit der Zimmermann-Reaktion sichtbar gemacht. Anschließend werden die ausgeschnittenen Zonen unter Zerlegung des Farbstoffes und quantitativer Rückbildung der ursprünglichen Ketosteroide extrahiert. In den Extrakten werden die Ketosteroide mit der Zimmermann-Reaktion quantitativ kolorimetrisch bestimmt. Die zu messende Farblösung wird durch Alkoholzusatz geklärt. Die Methode wurde für Dehydro-epiandrosteron Androsteron und Ätiocholan-ol-(3)-on-(17) ausgearbeitet und im stark salzsauer hydrolysierten Harn für die Trennung von Androsteron und Testanolon angewendet. Summary A method is described for the quantitative determination of 17-ketoateroids an paper chromatograms. Good separation into narrow zones is achieved by running the mobile phase three times using dimethylformamide-cyclohexane as solvent system. The Zimmermann reaction is employed to reveal the zones which are then cut out and extracted with decomposition of the dyestuff and quantitative regeneration of the original ketosteroids. The ketosteroids in the extracts are estimated colorimetrically by the Zimmermann reaction. The coloured solutions are clarified by the addition of alcohol before measurement. The method has been tested for the determination of dehydroepiandrosterone androsterone and aetiocholane-3-ol-17-one and has been applied for the separation of androsterone and testanolone in urine after hydrolysis with hydrochloric acid. ___MH

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