Antikörper gegen Topoisomerase I (Scl-70) - Vergleichende Untersuchungen zum Nachweis mit rekombinanten Protein-Antigenen und natürlichem Enzym

Journal/Book: Z. ärztl. Fortbild. (ZaeF) (1994) 7/8 Jg. 88: S. 505-511. 1994;

Abstract: Prof. Dr. med. Hans-Peter Seelig Privates Institut für Immunologie und Molekulargenetik GmbH Karlsruhe Zusammenfassung Antikörper gegen Topoisomerase I (anti-Topo I anti Scl-70) gelten als ein Marker der progressiven systemischen Sklerodermie. Die Angaben über die Häufigkeit von anti-Topo I schwanken beträchtlich was unter anderem durch unterschiedliche Nachweisverfahren mit verschiedenartigen Antigen-Präparationen bedingt ist. Um einen wesentlichen Parameter dieser Assays zu vereinheitlichen untersuchten wir die Verwendbarkeit rekombinanter Topo I als Antigen für den Nachweis der Autoantikörper. Drei überlappende rekombinante Topo-I-Proteine (N-terminaler zentraler und C-terminaler Teil des Moleküls) die das gesamte Enzym umfassen sowie natürliches aus Kalbsthymus isoliertes Antigen (n-Topo I) wurden mit ELISA und Immunoblot analysiert. Von 50 Seren die im ELISA mit n-Topo I reagierten erkannten 49 auch ein rekombinantes C-terminales Topo I-Protein unter identischen Test-Bedingungen. 37 Seren reagierten mit dem zentralen und zwei Seren mit dem rekombinanten N-terminalen Protein. Da alle Seren die mit dem N-terminalen und mittleren Protein reagierten auch das C-terminale Protein erkannten kann dieses als Ersatz für das natürliche Antigen herangezogen werden. In Immunoblot-Assays reagierten nur 92% (46/50) dieser Seren mit n-Topo I und 86% (43/50) mit dem rekombinanten C-terminalen Protein. Bei einer Analyse von 696 Routine-Seren von Patienten mit Verdacht auf rheumatische Erkrankungen bzw. mit manifesten Kollagenosen wurden mit dem rekombinanten C-terminalen Protein in zwei Fällen Antikörper gefunden die nicht mit n-Topo I reagierten. Aufgrund der guten Übereinstimmung der mit rekombinanten und natürlichen Antigenen erhaltenen Ergebnisse empfiehlt sich die Verwendung des rekombinanten Proteins das eine bessere Standardisierung des Nachweisverfahrens und Vergleiche der in verschiedenen Laboratorien erhaltenen Ergebnisse erlaubt. ab

Keyword(s): Autoimmun-Erkrankungen progressive systemische Sklerodermie ELISA Topoisomerase I (Scl-70) rekombinante Antigene

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